Métodos de teste para detecção de Bacillus subtilis
B. subtilis
Bacilo subtilisé um microrganismo comum que é frequentemente usado na indústria de rações, nomeadamente na sua produção e também como aditivo após a produção. A sua detecção é crucial para garantir a qualidade e a segurança da ração. O seguinte fornecerá uma introdução detalhada aos vários métodos de detecção, condições e padrões de teste paraBacilo subtilisno feed. Cada método tem suas próprias vantagens e desvantagens, portanto o usuário deve levar em conta a situação específica e o cenário de aplicação.
Método de cultivo tradicional
Processamento de amostra: Pesar uma certa quantidade de amostra, adicionar diluente para mistura e tratamento ultrassônico para garantir a liberação e dispersão deBacilo subtilis.
Diluição: Dilua a amostra processada em gradiente para garantir que cada diluição da amostra possa ser uniformemente revestida no meio de cultura.
Inoculação: Aplique a amostra diluída em uma placa de ágar nutriente, rotule o número da análise, a data e o nível de diluição.
Cultivo: Coloque as placas inoculadas em uma incubadora com temperatura constante de 37 ℃ por 16-20 horas e observe o crescimento das colônias bacterianas.
Observação das características das colônias: As colônias deBacilo subtilisgeralmente apresentam formas ásperas e irregulares em meios de cultura sólidos, com colônias maiores, de coloração branco leitosa a branco acinzentada.
Identificação bioquímica: Por meio de uma série de testes bioquímicos, como teste de oxidase, teste de enzima catalítica, teste de liquefação de gelatina e teste de redução de nitrato, confirme ainda mais se as bactérias isoladas sãoBacilo subtilis.
Método de Biologia Molecular
Detecção de PCR: A presença deBacilo subtilisé detectado pela amplificação de sua sequência genética específica por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). Este método tem alta sensibilidade e forte especificidade, mas requer equipamento caro e conhecimento profissional.
PCR quantitativa de fluorescência (qPCR): Detecção quantitativa da presença deBacilo subtilisamplificando sequências genéticas específicas, com alta sensibilidade e especificidade, mas também exigindo equipamento profissional e conhecimento operacional.
Métodos imunológicos
Ensaio imunoenzimático (ELISA): reflete indiretamente o conteúdo deBacilo subtilisanticorpos específicos em uma amostra detectando sua reação de ligação com antígenos. Este método tem alta sensibilidade, mas pode ser afetado pela qualidade dos reagentes e procedimentos experimentais.
Método de esferas imunomagnéticas: usando esferas imunomagnéticas para capturar especificamenteBacilo subtilise então realizar a detecção. Este método também tem alta sensibilidade e especificidade, mas a operação é mais complexa.
