Padrões de Teste para Protease em Preparações Enzimáticas
ICS 67.220.20
Classificação nº: X69
GB/T 23527-2009
PPadrões Nacionais da República da China de pessoas
Preparações de Protease
Emitido em: 2009-04-27
Implementado: 2009-11-01
Publicado por:PRepública da China Administração Geral de Supervisão de Qualidade, Inspeção e Quarentena e Comitê Nacional de Gestão de Padronização da China
Prefácio
Este padrão é baseado no QB 1805 – 1993 (Método Geral de Teste para Preparações de Enzimas Industriais) e QB 1805.3 – 1993 (Preparação de Protease Industrial).
O Apêndice B desta norma é um apêndice normativo, enquanto os Apêndices A, C e D são informativos.
Este padrão foi proposto pelo Conselho Nacional da Indústria Leve da China.
Esta norma está sob a jurisdição do Comitê Subtécnico de Fermentação Industrial do Comitê Técnico Nacional de Padronização da Indústria de Alimentos.
Este padrão foi elaborado por: Novozymes (China) Biotechnology Co., Ltd., Zhangjia Port Jinyuan Biochemical Co., Ltd., China Food Fermentation Industry Research Institute, Shandong Longda Bioengineering Co., Ltd., Zhaodong Richeng Enzyme Preparations Co., Ltd., Xingtai Xinxin Xiangyu Bioengineering Co., Ltd., Wuxi Saide Bioengineering Co., Ltd., e Beijing Donghua Qiangsheng Biotechnology Co., Ltd.
Os principais redatores desta norma são: Jingxue Zhang, Yongqi Li, Wei Zhang, Qingwen Guo, Yong He, Bo Yu, Bingyan Wu, Zhenyu Cao, Jin Qian e Yue Zhang.
Preparações de Protease
1. Âmbito de aplicação
Esta norma especifica os termos e definições, classificações de produtos, requisitos, métodos de teste, regulamentos de inspeção, bem como ícones, embalagem, transporte e armazenamento de preparações de Protease
Esta norma se aplica à produção, inspeção e venda de preparações de protease obtidas a partir de amido (ou açúcar) como matéria-prima, fermentação por microorganismos e purificação.
Este padrão não se aplica a preparações de protease extraídas de tecidos animais e vegetais, mas os requisitos de contagem deste padrão podem ser usados como referência.
As preparações de protease utilizadas como aditivos alimentares e aditivos para rações, além dos requisitos desta norma, também precisam consultar os demais requisitos regulamentares.
2. Referências normativas
As cláusulas nos documentos a seguir juntas tornam-se as cláusulas deste documento padrão por meio de citações. Para documentos de referência datados, todas as alterações subsequentes (não incluindo conteúdo de errata) ou revisões não são aplicáveis a esta norma. No entanto, todas as partes que concordam com esta norma são incentivadas a estudar se esses documentos são as versões mais recentes. Para documentos citados sem data, a última versão correspondente é aplicada a esta norma.
GB/T 191 Ícones paraPacondicionamento, armazenamento e transporte
Preparação do Reagente Químico GB/T 601: Solução de Titulação Padrão
GB 2760 Indicadores Higiênicos de Aditivos Alimentares
Peneiras de teste de malha de arame GB/T 6003.1 (GB/T 6003.1 – 1997, eqv ISO 3310-1: 1990)
3. Termos e Definições
Os seguintes termos e definições se aplicam a esta norma.
3.1. Protease
Uma enzima que corta as ligações peptídicas dentro das moléculas de proteína e transforma as moléculas de proteína em pequenas moléculas de peptídeos e aminoácidos.
3.2. Atividade de Protease
A atividade de protease é expressa em unidades de atividade de protease e é definida como 1 g de pó de enzima sólido (ou 1 ml de enzima líquida). Sob certas condições de temperatura e pH, a caseína é hidrolisada em 1 min para produzir 1 μg de tirosina, o que representa 1 unidade de atividade enzimática u/g (ou u/ml).
4. PClassificação do produto
4.1. By Campo de Aplicação do Produto
1. Produtos Classe A: Preparações enzimáticas para a indústria alimentícia e indústria de rações
2. Produtos Classe B: Preparações enzimáticas para outras indústrias
4.2. Por formulário do produto
A forma do produto é classificada em preparações enzimáticas sólidas e preparações enzimáticas líquidas.
4.3. Por faixa de pH do produto
Classificada em Protease Ácida, Protease Neutra e Protease Alcalina. Consulte o Apêndice A para as categorias, códigos e cepas de produção de preparações de protease comumente usadas na China.
5. Requisitos
5.1. Aparência
1. Forma sólida:pó ou grânulos branco a amarelo-amarronzado sem aglomeração e deliquescência e inodoro. Há um cheiro especial de fermentação.
2. Forma líquida:líquido amarelo claro a castanho com uma pequena quantidade de condensado permitido e inodoro. Há um cheiro especial de fermentação.
5.2. Requisitos Físicos e Químicos
Deve atender aos requisitos da Tabela 1:
Tabela 1 Requisitos Físicos e Químicos das Preparações de Lipase
Item | Forma Sólida | Forma Líquida |
Atividade enzimáticauma, u/g ou u/ml≥ | 50000 | |
Perda ao secarb, (%) ≤ | 8,0 | — |
Finura [0,40 mm (39 mesh) Taxa de Passagem de Peneira Padrão]b, %≥ | 80 | — |
uma:Pode ser conduzido de acordo com as especificações de atividade enzimática estipuladas no contrato entre o fornecedor e o comprador. b:Não é adequado para produtos granulados. | ||
5.3. Requisitos de higiene
Deve atender aos regulamentos nacionais relevantes.
6. Método de teste
6.1. Aparência
Pese 10 g (ou 10 ml) da amostra, observe, cheire para fazer um julgamento e registre as observações.
6.2. Atividade enzimática
Realize o teste de acordo com o Apêndice B. Os Apêndices C e D também podem ser consultados para realizar o teste.
6.3. Perda ao secar
6.3.1. Aparelho
6.3.1.1. Forno de Secagem Elétrico
6.3.1.2. Balança Analítica: precisão de 0,0001 g
6.3.1.3. Frasco de pesagem: 50 mm x 30 mm
6.3.2. Análise do procedimento
Use uma garrafa de pesagem seca a peso constante para pesar aproximadamente 2 g da amostra de enzima com precisão de ± 0,0002 g. Coloque-o em um forno elétrico de aquecimento 103 ºC ± 2 ºC, retire a tampa e coloque-o ao lado da garrafa de pesagem na lateral. Secar por 2 horas, remover, cobrir, colocar em dessecador para esfriar à temperatura ambiente e pesar.
6.3.3. Cálculo de Resultados
A perda na secagem é calculada de acordo com a fórmula 1:
Fórmula 1. Perda na Secagem
X2 = {(m1 –m2) ÷ (m1 -m)} x 100
Lenda:
X2:Perda de peso seco da amostra, %;
m1:A massa do frasco de pesagem e da amostra antes da secagem, g;
m2:A massa do frasco de pesagem e da amostra após a secagem, g;
m:O peso da garrafa de pesagem, g.
Os resultados obtidos devem ser arredondados para uma casa decimal.
6.4. Finura
6.4.1. Aparelho
6.4.1.1. Balança Analítica: precisão de 0,0001 g.
6.4.1.2. Peneiras Padrão:ɸ200 x 50 – 400/250,umand atende aos regulamentos de GB/T 6003.1.
6.4.2. Análise do procedimento
Pesar 100 g de amostra de enzima sólida, com precisão de 0,2 g. Coloque a peneira padrão na bandeja da peneira e, em seguida, transfira a amostra de enzima pesada para a peneira padrão. Em seguida, tampe e agite por 5 minutos (bater na lateral da peneira de vez em quando). Deixe repousar por 2 minutos, retire a tampa superior, transfira cuidadosamente todo o conteúdo da peneira para um béquer de massa conhecida e pese-o com uma balança.
6.4.3. Cálculos
A finura é calculada de acordo com a fórmula 2.
Fórmula 2. Finura
X2 = [(100 - m3) / 100] x 100
X2 = 100 - m3
Lenda:
X2:Finura, %;
m3:Massa da peneira, g.
O resultado é expresso como um número inteiro, (em %).
7. Regulamentos de Inspeção
7.1. Confirmação de lote
A unidade de produção é responsável por confirmar o número do lote do produto de acordo com suas regras correspondentes, devendo a qualidade dos produtos no lote ser uniforme.
7.2. Regulamentos de Amostragem e Tamanho da Amostra
7.2.1. A amostragem deve ser distribuída uniformemente ao longo do processo de enchimento, ou distribuída uniformemente no produto acabado após o enlatamento.
7.2.2. Devem ser adotados métodos apropriados para garantir a representatividade da amostragem e a limpeza do local de amostragem e do frasco de amostragem. A amostragem para testes microbiológicos deve ser realizada assepticamente.
7.2.3. Consulte a Tabela 2 para obter o tamanho da amostra de produto acabado. O tamanho da amostra a ser amostrado pode ser implementado de acordo com o tamanho do lote estimado na Tabela 2, ou pode ser determinado pelo fabricante e (ou) partes relacionadas. O volume de amostragem do lote não deve ser inferior a 300 ml (ou 300 g), e as amostras que não possuem o volume necessário devem ser adicionadas na proporção adequada.
Tabela 2 Tamanho da Amostragem do Produto Acabado
Lote/Barril de Caixa | Tamanho da Amostra/Barril ou Saco |
< 50 | 2 |
51 - 500 | 3 |
> 500 | 4 |
Nota 1:O lote refere-se ao número de unidades de commodities contidas no lote, em barris ou caixas. Nota 2:O tamanho da amostra refere-se ao número de unidades amostrais contidas na amostra, em barris ou sacos. | |
7.3. Classificação de Inspeção
7.3.1. Inspeção de fábrica (saída)
7.3.1.1. Antes do produto sair da fábrica, o departamento de supervisão e inspeção de qualidade do fabricante deve realizar a inspeção lote a lote de acordo com as disposições desta norma. Se a inspeção for qualificada e um certificado de inspeção de qualidade estiver anexado, o produto poderá ser enviado.
7.3.1.2. Itens de inspeção: aparência, atividade enzimática, perda por secagem (sólido) e colônias totais de produtos Classe A.
7.3.2. Inspeção de tipo
7.3.2.1. Itens de inspeção: todos os itens exigidos nesta norma.
7.3.2.2. Em circunstâncias normais, a inspeção de tipo do mesmo tipo de produto deve ser implementada pelo menos uma vez por ano e deve ser implementada se ocorrer uma das seguintes condições:
uma. Quando houver grandes mudanças nas matérias-primas (e auxiliares);
b. Ao alterar processos ou equipamentos-chave;
c. Quando a produção do novo produto reagente ou do produto normalmente produzido é retomada após 3 meses de suspensão;
d. Quando há uma grande diferença entre a inspeção de fábrica e o resultado da inspeção de tipo mais recente;
e. Quando a agência nacional de supervisão e inspeção de qualidade precisa de inspeção aleatória de acordo com os regulamentos relevantes.
7.4. Regulamentos de julgamento
7.4.1. Quando a inspeção de fábrica e (ou) inspeção de tipo são qualificadas, o certificado de inspeção de qualidade do produto deve ser emitido pelo departamento de inspeção de qualidade.
7.4.2. Quando a inspeção de fábrica e (ou) inspeção de tipo não forem qualificadas, duplique a análise da amostra com base no lote original. Se ainda não estiver qualificado, o produto é considerado não qualificado e não deve ser enviado.
8. Ícones, embalagem, transporte e armazenamento
8.1. Ícones
8.1.1. A embalagem externa do produto deve utilizar os ícones que atendam aos requisitos da GB/T 191.
8.1.2. A embalagem do produto deve ser afixada com uma etiqueta firme. O conteúdo dos ícones deve incluir o nome do produto, local de origem, nome da planta, especificações (atividade enzimática), data de produção, lote ou número do código, prazo de validade, etc.
8.2. Embalagem
A embalagem interna do produto e (ou) o revestimento interno do recipiente da embalagem devem usar os materiais aprovados pelo estado, e os produtos Classe A devem usar os materiais que atendem às normas de higiene correspondentes das embalagens/recipientes de alimentos.
8.3. Transporte
O produto deve ser manuseado com cuidado durante o transporte para evitar chuva e exposição à luz solar. Os veículos e ferramentas de transporte devem ser limpos, não tóxicos e não poluentes. É estritamente proibido misturar e transportar com substâncias tóxicas, nocivas e corrosivas.
8.4. Armazenar
O produto deve ser armazenado em ambiente fresco e seco. É estritamente proibido ser armazenado com substâncias tóxicas, nocivas e corrosivas.
9. Data de expiração (prazo de validade)
9.1. Sob condições de refrigeração de 4 ºC – 8 ºC, a vida útil da preparação enzimática líquida é de 90 dias no mínimo. A 25 ºC, a vida útil da preparação enzimática sólida é de 180 dias no mínimo. A empresa deve indicar especificamente o prazo de validade de acordo com os requisitos listados acima. A atividade enzimática medida durante o prazo de validade não deve ser inferior à atividade enzimática indicada.
9.2. As preparações enzimáticas são produzidas contendo substâncias biologicamente ativas. Além da vida de prateleira, a atividade enzimática pode ser reduzida durante o período de armazenamento, mas ainda tem valor de uso.
